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真菌检查中G试验与GM试验的区别

检验星空
2024-08-29

真菌,是一种真核生物。最常见的真菌是各类蕈(音xùn)类,另外真菌也包括霉菌和酵母。现在已经发现了七万多种真菌,估计只是所有存在的一小半。大多真菌原先被分入动物或植物,现在成为自己的界,分为四门。真菌自成一门,和植物、动物、细菌相区别。


真菌和其他三种生物最大的不同之处在于:真菌的细胞有含甲壳素(又叫几丁质、壳多糖)为主要成分的细胞壁,和植物的细胞壁主要是由纤维素组成的不同。细菌细胞壁主要成分则是肽聚糖,真菌细胞壁中主要成分为几丁质纤维素葡聚糖甘露聚糖等,这些多糖都是单糖的聚合物。


G试验的代表厂家是美国查尔斯河实验室公司G试验检测系统,该系统主要检测真菌的细胞壁成分--(1,3)-β-D-葡聚糖。而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分。


[hòu]一种节肢动物,甲壳类,生活在海中,尾坚硬,形状像宝剑,居住于沙质浅水海域,常爬行或全身潜行于泥沙中)凝血系统中的凝血酶原G因子能识别这种葡聚糖,是G的天然检测者。G因子的α亚基特异性识别G后,可激活血清凝固酶原上的β亚基,形成凝固酶,凝固酶可以参与凝血酶原级联反应,使凝固蛋白原转变为凝胶状的凝固蛋白。因此在机体的体液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据。


即使不能确定菌种,但能肯定是否有真菌感染。指导临床科学合理的使用抗真菌药物,因此可以作为侵袭性真菌感染的早期诊断指标。当检测到标本中葡聚糖含量较高时,即可予以系统治疗,不必等待真菌培养的结果,对临床医生采取积极的治疗提供依据,且动态快速检测,不受血中抗生素和酶等的影响。


另外,该公司还在此检测系统上开发出革兰氏阴性菌脂多糖检测试剂,称为鲎试验。其原理是革兰氏阴性菌脂多糖(内毒素)激活了鲎的凝血酶原C因子,形成凝固酶,凝固酶可以参与凝血酶原级联反应,使凝固蛋白原转变为凝胶状的凝固蛋白。通过内毒素水平的定量快速检测评价由革兰氏阴性细菌引起疾病的临床诊断如腹膜炎、脓毒症、SIRS、和MODS。


GM试验的代表厂家是美国BIO-RAD公司开发的曲霉菌抗原检测试剂盒,检测方法为ELISA法,检测的物质是半乳甘露聚糖抗原,主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。


曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β(1-5)呋喃半乳糖残基,菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原。GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度,连续检测GM可作为治疗疗效的监测,在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。

从上表也能看出:G试验阳性,GM试验可能为阴性,如念珠菌属、镰刀菌属感染;G试验阴性,GM试验可能为阳性,如隐球菌属感染。


G试验的临床应用


1、早期诊断:侵袭性真菌感染增多且复杂,早期症状无特异性,往往被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。

2、快速诊断:真菌感染就医的患者,往往病情严重,传统的微生物分离、培养与鉴定需要时间较长,患者在等待期间有可能病情加重,甚至死亡。

3、指导用药:快速确定真菌感染后,选择好治疗方案,有针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小,疗效高,价格适宜的药物提供准确的依据。

4、动态观察:可用于动态随访疾病的变化,(1-3)-β-D葡聚糖水平高低能够提示疾病的发展和预后。(1-3)-β-D葡聚糖水平在确诊IFI 患者的血清中出现持续升高,而随着药物的使用,对药物敏感者可很快出现(1-3)-β-D葡聚糖水平下降及转阴,而药物治疗无效人群(1-3)-β-D葡聚糖值无明显改变。

5、鉴别真菌种类:不同的(1-3)-β-D葡聚糖值可反映不同真菌菌种感染,如:

念珠菌感染者血清平均(1-3)-β-D葡聚糖值为755 pg/mL,

曲霉感染者平均(1-3)-β-D葡聚糖值为1103pg/mL,

镰刀霉感染者平均(1-3)-β-D葡聚糖值为1652 pg/mL,

隐球菌和接合菌(毛霉、根霉)细胞壁不产(1-3)-β-D葡聚糖,

感染接合菌的患者血清(1-3)-β-D葡聚糖值为0

而对于口腔和其他器官的真菌定植患者,(1-3)-β-D葡聚糖值也较低,一般不超过20pg/mL。

6、监护病程:监护深部真菌感染易感人群的病发状态。


GM试验的临床应用


近10年来,临床侵袭性真菌感染的患者数量呈明显增长趋势,构成住院病人死亡的主要原因之一。其中侵袭性曲霉菌感染是构成真菌感染的最严重形式,曲霉菌感染主要发生在中性粒细胞减少症病人(抗癌治疗引起)和免疫抑制剂治疗的病人(器官移植,特别是骨髓移植)以及使用皮质激素治疗的病人中。通常开始于吸入环境中的曲霉菌孢子之后。


由于曲霉菌几乎不能从血培养基中分离出来,其诊断通常建立在非特异性诊断放射影像学检查结果上(临床症状,CT扫描,胸部X-光检查等),很难实现早期诊断。血清曲霉菌半乳甘露聚糖抗原检测的出现,为实现曲霉菌感染的早期诊断带来了巨大的临床价值,获得国内外医生的广泛认可,已成为侵袭性曲霉菌感染诊断的重要检测方法。


目前,该检测已被全球权威组织EORTC/MSG推荐使用并定义为侵袭性曲霉菌感染早期诊断金标准;国内的《中国侵袭性真菌感染工作组》《中华医学会重症医学分会》也对该检测为临床带来的价值做了透彻的解读。

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