溶剂大比拼——细胞实验篇

Original 小 M MCE 抑制剂

2024-09-04

五一劳动节假期就要来啦，小伙伴们是要出去玩，还是宅家里呢，或者继续奋斗在实验室？萌 Cece 已经买好了机票，准备出去享受假期咯。为了有个完美的假期，您是不是和萌 Cece 一样在“赶实验”呢~~瞧瞧，因为产品溶解的问题溶剂们都“吵”起来啦~~

■ 不到不得已，谁也不想现用现配

细胞实验的工作浓度通常在 μM 级别，有的还是 nM 和 pM，要做到现用现配，难度系数有点高，好比让一个日均不到 1000 步的人去爬 5000 米的山峰，这难度，你细品！一方面这个操作对天平的精度要求很高，误差太大，再者，每一次称量都会有损失，称量的过程也难以做到无菌操作，当然，对于一些极不稳定的化合物，比如有极易氧化的特性的化合物，“臣妾做不到”也是情有可原，现用现配是刚需。

■ 不提比例就判定有毒，实在是不负责任的耍流氓行为

以 DMSO 为例，一般建议其终浓度在 0.1% 以下，这个浓度是非常保守的建议了，有一些细胞本身并不敏感，可以承受 0.5% 的 DMSO，甚至 1% 的 DMSO 对细胞活力也没有明显影响。不过呢，不管什么比例，记得要做好对照哦！

■ 凡事都有例外，没有万能，只有合适

正如前面所提到的，DMSO 固然可用于诸多化合物的溶解，但是面对含铂化合物的时候，也是无能为力呢，这个时候，就需要 DMF 等辅助出场了。再比如辛伐他汀 (Simvastatin)，需要溶于乙醇、再用 NaOH 激活，才可进行实验。

■ 溶解药物，既要讲“法理”，也要通“人情”

比如，GW4869 微溶于 DMSO，难溶于水，除了借力甲磺酸，也可用 DMSO 配置成均匀的混悬液作为储备液，最后用培养基稀释可达到澄清状态；比如，天气冷的时候，可先预热 DMSO 母液和培养基，这样稀释后减少析出的可能性；比如配置/稀释的过程中，如遇到析出情况，可借助超声/加热的方式辅助溶清；比如购买了大量粉末，瓶子不够大，无法配置到相应浓度的时候，可分步溶解再转移至大容器处理。

■ 不要随便拒绝没听过的溶剂

四氢呋喃 (THF)、丙酮、乙腈、乙酸乙酯，这些溶剂不常见，却是友好的存在，比如丙酮，在 MCF-7、RAW-264.7 以及 HUVEC 细胞系中，比 DMSO、乙醇和 DMF 都更加友好、毒性更小。再比如在 CV1-P 细胞系中，0.5% THF 对细胞活力也没有明显影响。

暴露于不同溶剂的 MCF-7、RAW-264.7 和 HUVEC 细胞的细胞存活率

生物实验是一个不断探索和推翻的过程，药物溶解简单而又不平凡，以上是萌 Cece 对部分药物的溶解建议，仅供参考。宝宝们有什么与众不同的故事欢迎找萌 Cece 唠嗑呀，留言评论区，板凳瓜子已备好，欢迎你来！提出有建设性意见的小伙伴有机会获得萌 Cece 的神秘小礼品哦 ~~

最后，萌 Cece 祝大家没有溶解不了的药物。

参考文献

下滑查看更多 ↓

1. Shigeo Nagashima, Hiroaki Okamoto, et al. Hepatitis E virus egress depends on the exosomal pathway, with secretory exosomes derived from multivesicular bodies. J Gen Virol. 2014 Oct;95(Pt 10):2166-2175.

2. S Adler, S. Bremer, et al. The effects of solvents on embryonic stem cell differentiation. Toxicol In Vitro. 2006 Apr;20(3):265-71.
3. Leila Jamalzadeh, Hosein Ghafoori, et al. Cytotoxic Effects of Some Common Organic Solvents on MCF-7, RAW-264.7 and Human Umbilical Vein Endothelial Cells. Avicenna J Med Biochem. 2016 June; 4(1):e33453.
4. Orly Livny, Betty Schwartz, et al. Lycopene inhibits proliferation and enhances gap-junction communication of KB-1 human oral tumor cells. J Nutr. 2002 Dec;132(12):3754-9.

精彩往期

◆ 铁死亡是什么，如何检测？您要的“一文通”来了！